Kopi hijau bermutu rendah dengan protease Bacillus amyloliquefaciens NY124: ekstraksi, pemurnian, dan sinergi fungsional asam klorogenat dan trigonelin

Bagaimana jika biji kopi yang Anda buang bisa menjadi harta karun senyawa penyehat? Sebuah studi baru mengubah kopi hijau bermutu rendah menjadi antioksidan dan agen anti-obesitas yang ampuh.

Biji kopi cacat—sering dibuang—menyimpan senyawa bioaktif berharga seperti asam klorogenat (CGA) dan trigonelin. Namun kandungan kafeinnya yang tinggi membatasi pemanfaatannya. Kini, ilmuwan menemukan cara hemat biaya untuk mengekstrak dan memurnikan bahan-bahan ini menggunakan enzim bakteri dan kromatografi kolom sederhana.

Perlakuan uap meningkatkan kadar CGA hingga 35 g per kilogram berat kering. Di antara enam strain bakteri, Bacillus amyloliquefaciens NY124 menonjol dalam kemampuan ekstraksinya. Enzimnya, protease 42 kDa, dimurnikan dan dikonfirmasi dengan SDS-PAGE dan zimografi. Menggunakan metodologi permukaan respons, tim menggandakan produksi CGA dengan kondisi optimal: 1,88 U/mL protease, 7,87% kopi hijau, dan 6,85 jam.

Untuk menghilangkan kafein, resin Diaion HP-20 menghilangkan 89% kafein, sementara kromatografi kolom silika menghasilkan CGA dan trigonelin bebas kafein, masing-masing dengan kemurnian di atas 95%. Campuran bebas kafein yang disebut Decaf menunjukkan aktivitas fungsional lebih kuat daripada masing-masing senyawa saja—sinergi yang jelas. Decaf menunjukkan aktivitas antioksidan sepuluh kali lebih tinggi daripada kontrol dan menghambat α-glukosidase sebesar 52,97%, lima kali lebih baik daripada kontrol.

Dalam uji seluler, Decaf mengurangi akumulasi lipid sebesar 37% dan meningkatkan lipolisis, dengan pelepasan gliserol bebas meningkat 89% dibandingkan dengan adiposit yang tidak dirawat. Ini menunjukkan efek anti-obesitas yang menjanjikan, mengubah biji limbah menjadi bahan pangan fungsional dengan potensi kesehatan nyata.

Poin Kunci

• Uap meningkatkan CGA hingga 35 g/kg berat kering.
• Protease NY124 menggandakan produksi CGA, menghilangkan 89% kafein.
• Decaf menunjukkan sinergi: 10x antioksidan, 37% lebih sedikit lipid.